免疫胶体金银细胞化学染色的固定剂选择 |
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免疫胶体金银细胞化学染色的固定剂选择 免疫胶体金银染色和其它免疫细胞化学方法一样,要想得到好的染色效果,关键取决于标本处理是否合适,只有使抗原性及组织结构保存的好,才能使以后的染色成功成为可能,其次要用高特异性和价的一抗,选择合适的稀释度。由于免疫组化方法广泛应用于不同的生物学科,所要检出的抗原种类繁多,性质也各不相同。因此,不可能有一种适用于所有抗原的固定剂,而是根据不同的抗原性质区别对待。根据我们使用的固定剂介绍如下,供参考。 一、固定剂的选择及固定时间(详见表5-9) (1)Karovsky's 液pH7.3。 (2)PAP液(Periodate—lysine – paraformaldehyde fixative) 配制见附录一。 表5-9 各种抗原固定剂的选择及固定时间
二、切片的处理与粘附。 免疫组化染色过程较长,洗的次数很多,而且均在振荡洗涤,抗原片附贴不紧,往往在zui后的时刻,还没有等显色就会脱落导致前功尽弃,这个环节 虽小却会影响大局,因此,为了保证切片染色成功必须把切片处理好,解除掉片的后顾之忧 |