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GBC-SD+luc人胆囊癌细胞+luc传代/复苏技巧
点击次数:265 更新时间:2024-06-26

GBC-SD+luc人胆囊癌细胞+luc

Human gallbladder cancer cell ,GBCSD luc

货号:YJ-0025a(STR(GBC-SD)鉴定)

价格: 3200.0

规格: 1*10 6

细胞介绍

GBC-SD 细胞株是王展明等2000年从一位61岁的男性低分化胆囊癌患者中建立的。 细胞的形状有多边形、纺锤形和正方形。 分泌CEACA19-9。倍增时间大约为21.4小时。 可移植到裸鼠。 生成的肿瘤与原发肿瘤相似。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。

该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。

细胞特性

1 来源:胆囊癌 男

2 形态:上皮细胞样  贴壁生长

3 含量:>1x106  细胞数

4 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途:仅供科研使用。

细胞筛选

该细胞为稳定转染Luc的细胞,随细胞传代次数的增加,其Luc荧光强度会逐渐减弱。若实验要求需要维持荧光强度,可以加入嘌呤霉素进行再次筛选。        

建议收到细胞后至少传3代,冻存留种后再进行筛选。

初次进行细胞筛选时,建议加入终浓度为1ug/ml嘌呤霉素的完全培养基维持培养,若无细胞漂浮或者漂浮较少,即可更换为含2ug/ml嘌呤霉素的完全培养基继续筛选,以此类推,至最高药物浓度为5ug/ml。若筛选过程中,漂浮细胞大于60%,则停止筛选,换成正常培养基培养,至细胞密度约80%,可继续加入同浓度嘌呤霉素进行筛选。当加入5ug/ml嘌呤霉素时细胞正常增殖,可停止筛选,用不含药完全培养基正常培养。

GBC-SD+luc人胆囊癌细胞+luc.png

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备:1640 基础培养基(推荐:YJ-0002),优质胎牛血清10 %P/S 1 %

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二.细胞处理:

1 冻存细胞的复苏:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。


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