CCK-8试剂盒实验原理:本实验采用双抗体夹心ELISA法。向预先包被了抗体的酶标孔中加入样本,再加入生物素标记的识别抗原,在三十七度下孵育三十分钟,两者与固相抗体竞争结合形成免疫复合物,经PBST洗涤除去未结合的生物素抗原,然后加入亲和素-HRP,亲和素-HRP与生物素抗原结合,洗涤后结合的HRP催化TMB成蓝色,随后在酸的作用下转化成黄色,在一定波长下有吸收峰,吸光值与样本中抗原的浓度成负相关。
CCK-8试剂盒安全操作事项:
1、不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
2、实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3、避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
CCK-8试剂盒标本收集需要注意的问题:
1、收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。
2、标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。
3、血清和血浆避免使用溶血,高血脂标本。
4、可根据标本的实际情况,做适当倍数稀释(建议做预实验,以确定稀释倍数)。
5、标本收集后若不及时检测,需按一次使用量分装, 冻存于二十度到零下八十度的电冰箱内,避免反复冻融。
6、收集标本时,应该做好防护措施(此如戴手套,护目镜等),认为所有标本都具有一定的潜在危险性。
7、收集标本,尽量做到双份的用量,避免一次实验失败,重复实验时标本缺失,从而耽误实验进程。
8、样本处理应该在生物安全柜里面,并且正确使用生物安全柜。