Version06062012
EDTABuffer(50×)
EDTA缓冲液(IHC抗原修复液,50×)
Cat.No.K0129
保存:2-8℃
组分说明
Cat.No.
Volume
K0129
100ml
产品简介
福尔马林固定时,组织中的许多氨基酸残基形成醛键、羧甲键而封闭了部分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联也使
抗原决定簇隐蔽。因此,对于石蜡切片,要求在进行 IHC染色前,先进行抗原修复,即将固定时分子之间所形成的交联破
坏,恢复抗原的原有空间形态。EDTA缓冲液是除柠檬酸缓冲液外另一种常用的 IHC抗原修复液。有部分抗原用 EDTA缓
冲液修复效果好于柠檬酸缓冲液。
注意事项
1.请使用足量的修复液,修复过程中保证组织切片*浸没在修复液中。
2.使用沸水浴或高压修复时,操作请务必谨慎,尤其高压修复时,保证锅内有足量的修复液,以防止干烧。
3.推荐的修复时间为达到理想修复效果所需时间,如组织粘片不牢,容易掉片,请酌情减少修复时间。
使用方法
1.高压热修复:根据需要量,取适量本品,稀释 50倍后即可使用。将稀释好的修复液加入高压锅内,将待修复切片浸于
其中,保证修复液没过组织(最好将切片浸入盛修复液的塑料容器内,再置于锅内修复液浴中),盖上压力锅盖,加热
至均匀喷汽,从喷汽开始计时,1~2分钟后压力锅离开热源,自然冷却至室温,取出切片,蒸馏水冲洗后,再用PBS
(0.01M pH7.4)漂洗 2次,每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。此方法修复强度最大,是Z常用的热修复法。
2.
微波热修复:根据需要量,取适量本品,稀释 50倍后即可使用。将切片放入盛有修复液的容器中,置微波炉内加热至
沸腾,停止加热,使容器内液体温度下降保持在 95℃~98℃之间并持续 10~15分钟(注意:请根据具体机型酌情设置
条件,务必满足以上步骤中对温度和时间的要求)。取出容器,自然冷却至室温,取出切片,蒸馏水冲洗后,再用PBS
(0.01M pH7.4)漂洗 2次,每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。此方法修复强度大于沸水浴,但小于高压修复。
3.
沸水浴热修复:根据需要量,取适量本品,稀释 50倍后即可使用。将待修复切片*浸入盛有修复液的容器中,并将
此容器置于盛去离子水的大器皿水浴中,电炉上加热煮沸,从修复液的温度到达 95℃起开始计时 15~20分钟。让切片
在修复液中自然冷却至室温,蒸馏水冲洗,再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2次,每次 3分钟。下接免疫组化染色
步骤。该方法效果较微波和高压修复差。
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