植物蛋白抽提试剂盒说明书

Plant Protein Extraction Kit

Cat. No.   K0885   

保存：蛋白酶抑制剂混合物：-20℃

    其它组分：室温  

组分说明

Catalog no.                   K0885B       K0885C

Kit Size                      25 次          100  次

Plant Protein Extraction Reagent   25 ml         100 ml

蛋白酶抑制剂混合物           250  μl         1 ml

产品简介

    本植物蛋白抽提试剂盒可从新鲜、冰冻或干燥植物组织中提取可溶性植物蛋白。适用于多种植物及植物的不同部位（如根、茎、叶、花、种子等）蛋白提取，高效提取植物蛋白，比传统的方法提取蛋白产量大、活性高、速度快。所提蛋白可直接进行蛋白电泳分析、免疫沉淀、Western  Blot、蛋白活性测定及蛋白纯化等实验。所提蛋白可用 BCA蛋白定量试剂盒（#K0014）进行浓度的测定。

注意事项

 1. 本品含有1mM EDTA。

 2. 本产品适用于提取植物叶子、根等组织蛋白。

 3. 为防止蛋白降解，所有的操作尽量在冰上进行。

 4. 使用本产品提取后蛋白，可采用BCA 法进行蛋白定量。

 5. 为了获得实验J效果，请根据实验调整J使用量。

操作步骤  

 1.  请在蛋白抽提前取出实验所需蛋白抽提试剂进行预冷，  按照1:99比例加入蛋白酶抑制剂混合物（例如990μl抽提试剂中加入10  μl蛋白酶抑制剂混合物），使蛋白酶抑制剂混合物在抽提试剂中成1×工作液。

     注意：在进行蛋白抽提前2-3分钟内加入蛋白酶抑制剂混合物。

 2.  称量试验植物组织的重量。按照组织：抽提试剂=1：5（g/ml）的比例加入蛋白抽提试剂并匀浆处理（裂解液的使用量依据植物不同部位的而定）。若需要浓缩的蛋白提取物，可适当减少植物蛋白抽提试剂使用量。

     注意：匀浆前将大块的植物组织剪成小块，机械匀浆器可选用30,000rpm，匀浆10s，间歇10s，反复三次进行裂解，根据组织样本不同选用适合的匀浆方式。

 3.  匀浆后冰上孵育20分钟（冰上放置时间可适当延长至30分钟）。

 4.  4℃  12,000 rpm，离心20分钟。

 5.  收集上清中的可溶性蛋白，进行下一步的纯化或下游分析。

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